CDCP1 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (m): sc-430933

Übersicht

Cdcp1 kodiert CDCP1, ein einpassiges transmembranäres Glykoprotein, das an der Zelloberfläche angereichert ist und dort als Gerüst- und Signalplattform für adhäsions- und stressresponsive Signalwege fungiert. CDCP1 wird an Tyrosinresten phosphoryliert und bindet Src-Familien-Kinasen sowie PKC-Signalisierung, wodurch Zytoskelett-Remodelling, Zellmigration, Überleben und Interaktionen mit der extrazellulären Matrix beeinflusst werden. In Mausmodellen wurde die Cdcp1-Aktivität mit dem Verhalten epithelialer und stromaler Zellen, Anoikis-Resistenz und einer kontextabhängigen Regulation invasiver Phänotypen in Verbindung gebracht. Eine fehlregulierte CDCP1-Signalisierung wird häufig in Modellen der Tumorprogression, metastaseassoziierten Programme und entzündlichen Mikroumgebungen untersucht, was sie für die mechanistische Analyse von Signalwegen relevant macht.

Das CDCP1 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (m) ist ein Pool von Plasmiden, die für die gezielte Disruption des Cdcp1-Gens in mouse-Zelllinien entwickelt wurden. Jedes Plasmid koexprimiert eine einzigartige Single-Guide-RNA (sgRNA), die auf eine bestimmte Stelle innerhalb des Cdcp1-Gens abzielt, zusammen mit der Streptococcus pyogenes Cas9-Nuklease. Die Plasmide kodieren zudem für GFP, was die fluoreszente Identifizierung und Anreicherung erfolgreich transfizierter Zellen mittels Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie ermöglicht.

Das Multi-Guide-Design erhöht die Wahrscheinlichkeit, dass Insertionen oder Deletionen (Indels) entstehen, die den offenen Leserahmen von Cdcp1 nach der Cas9-vermittelten Bildung von Doppelstrangbrüchen unterbrechen. Durch das CRISPR/Cas9-System verursachte DNA-Brüche werden über endogene NHEJ-Wege (Non-Homologous End Joining) repariert, was häufig zu Frameshift-Mutationen führt, die die CDCP1-Proteinexpression aufheben.

Dieses CRISPR-Knockout-System ermöglicht die effiziente Erzeugung von Cdcp1-defizienten Zellmodellen zur Untersuchung der CDCP1-Signalübertragung, für funktionelle Genomstudien, in der Krebsbiologieforschung sowie zur Bewertung therapeutischer Reaktionen in menschlichen Zelllinien.

Hauptmerkmale

• sgRNAs, die auf Cdcp1-Exone abzielen, die für die CDCP1-Funktion entscheidend sind
  Ko-Expression von SpCas9 und sgRNA aus einem einzigen Plasmid zur vereinfachten Verabreichung
  GFP-Reporter zur Identifizierung transfizierter Zellen
  Pool von Plasmiden, die auf mehrere Cdcp1-Genomstellen abzielen, um die Knockout-Effizienz zu verbessern
  Kompatibel mit der Verabreichung durch Transfektion

Designvarianten

CRISPRs +/- HDRs

• gRNAs, die vom CDCP1 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (m) und vom CDCP1 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (m2) kodiert werden, zielen auf unterschiedliche Stellen innerhalb des Cdcp1-Lokus ab. Es kann ein oder beide Targeting-Designs verfügbar sein. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
  HDR-Donorkonstrukte, kodiert durch das CDCP1 HDR-Plasmid (m) und CDCP1 HDR-Plasmid (m2) kodiert, enthalten eine Puromycin-Resistenzkassette und einen RFP-Reporter, flankiert von Cdcp1-Homologiearmen, um die homologe Reparatur an definierten Cdcp1-Zielstellen entsprechend den CRISPR/Cas9-KO-Designs zu unterstützen. Die Verfügbarkeit von HDR-Donoren kann variieren. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.