Cdc37 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h): sc-401574

Übersicht

CDC37 kodiert Cdc37, einen konservierten HSP90‑Co-Chaperon, der ein breites Spektrum an Proteinkinasen als Gerüstprotein bindet und stabilisiert und so deren Reifung, konformationelle Aufrechterhaltung und Signalkompetenz unterstützt. Durch die Koordination der HSP90‑Client-Interaktionen beeinflusst Cdc37 zentrale Prozesse wie Zellzyklusprogression, Stressantworten und Signaltransduktion in MAPK-, PI3K–AKT- und weiteren kinasegetriebenen Signalwegen. Eine Störung von CDC37 kann die Proteostase onkogener und entwicklungsrelevanter Kinasen verändern und dadurch Phosphorylierungsnetzwerke sowie nachgeschaltete transkriptionelle Programme umgestalten. Als Regulator der Kinase-Homöostase wird CDC37 häufig im Kontext aberranter Proliferation, proteotoxischen Stresses und Signalweg‑Reprogrammierung untersucht, wie sie für die Krebsbiologie und andere kinaseassoziierte Erkrankungen relevant sind.

Das Cdc37 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) ist ein Pool von Plasmiden, die für die gezielte Disruption des CDC37-Gens in human-Zelllinien entwickelt wurden. Jedes Plasmid koexprimiert eine einzigartige Single-Guide-RNA (sgRNA), die auf eine bestimmte Stelle innerhalb des CDC37-Gens abzielt, zusammen mit der Streptococcus pyogenes Cas9-Nuklease. Die Plasmide kodieren zudem für GFP, was die fluoreszente Identifizierung und Anreicherung erfolgreich transfizierter Zellen mittels Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie ermöglicht.

Das Multi-Guide-Design erhöht die Wahrscheinlichkeit, dass Insertionen oder Deletionen (Indels) entstehen, die den offenen Leserahmen von CDC37 nach der Cas9-vermittelten Bildung von Doppelstrangbrüchen unterbrechen. Durch das CRISPR/Cas9-System verursachte DNA-Brüche werden über endogene NHEJ-Wege (Non-Homologous End Joining) repariert, was häufig zu Frameshift-Mutationen führt, die die Cdc37-Proteinexpression aufheben.

Dieses CRISPR-Knockout-System ermöglicht die effiziente Erzeugung von CDC37-defizienten Zellmodellen zur Untersuchung der Cdc37-Signalübertragung, für funktionelle Genomstudien, in der Krebsbiologieforschung sowie zur Bewertung therapeutischer Reaktionen in menschlichen Zelllinien.

Hauptmerkmale

• sgRNAs, die auf CDC37-Exone abzielen, die für die Cdc37-Funktion entscheidend sind
  Ko-Expression von SpCas9 und sgRNA aus einem einzigen Plasmid zur vereinfachten Verabreichung
  GFP-Reporter zur Identifizierung transfizierter Zellen
  Pool von Plasmiden, die auf mehrere CDC37-Genomstellen abzielen, um die Knockout-Effizienz zu verbessern
  Kompatibel mit der Verabreichung durch Transfektion

Designvarianten

CRISPRs +/- HDRs

• gRNAs, die vom Cdc37 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) und vom Cdc37 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h2) kodiert werden, zielen auf unterschiedliche Stellen innerhalb des CDC37-Lokus ab. Es kann ein oder beide Targeting-Designs verfügbar sein. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
  HDR-Donorkonstrukte, kodiert durch das Cdc37 HDR-Plasmid (h) und Cdc37 HDR-Plasmid (h2) kodiert, enthalten eine Puromycin-Resistenzkassette und einen RFP-Reporter, flankiert von CDC37-Homologiearmen, um die homologe Reparatur an definierten CDC37-Zielstellen entsprechend den CRISPR/Cas9-KO-Designs zu unterstützen. Die Verfügbarkeit von HDR-Donoren kann variieren. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.