Plásmido Doble Nickase (h) CD93: sc-407484-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)CD93 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa CD93 (h) y el plásmido de doble nickasa CD93 (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a CD93. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: CD93 Anticuerpo (B-1): sc-365172
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) CD93 | sc-407484-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) CD93 | sc-407484-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
CD93 es una glicoproteína transmembrana de tipo I expresada de forma destacada en células endoteliales y en células del linaje mieloide, donde participa en la señalización asociada a la adhesión y en la regulación de las respuestas inflamatorias. Interactúa con la matriz extracelular y con procesos relacionados con el complemento para modular el tráfico de leucocitos, la eferocitosis y la homeostasis vascular, conectando la actividad inmunitaria innata con la remodelación tisular. La actividad de CD93 se estudia comúnmente en el contexto de programas angiogénicos, la función de barrera endotelial y el comportamiento de monocitos/macrófagos, procesos que con frecuencia se ven alterados en estados de enfermedad inflamatoria crónica. Se han descrito cambios en la expresión de CD93 en diversas patologías asociadas al sistema inmunitario y al sistema vascular, lo que lo convierte en un objetivo útil para estudios mecanísticos de las interacciones entre el sistema inmunitario y el estroma.
CD93 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus CD93 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de CD93. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de CD93. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con CD93 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.