CD8-β Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-400950-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- CD8-βO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase CD8-β (h) e o Plasmídeo Double Nickase CD8-β (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para CD8B. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:CD8-β Anticorpo (F-5): sc-25277
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
CD8-β Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-400950-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
CD8-β Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-400950-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
CD8B codifica a cadeia CD8-β, uma glicoproteína transmembrana que se associa à CD8-α para formar o correceptor CD8 nos linfócitos T citotóxicos. Ao ligar-se a moléculas de MHC classe I, o CD8 aumenta a sensibilidade do TCR e recruta a quinase LCK da família Src para amplificar as cascatas de sinalização a jusante que moldam a ativação, a diferenciação efetora e a formação da sinapse imunológica. A expressão de CD8B e a composição do correceptor CD8 influenciam as respostas citotóxicas específicas ao antígeno, os programas de exaustão de células T e a dinâmica da vigilância imune. Alterações na função da linhagem CD8 são relevantes em estudos de infecção viral crônica, imunologia tumoral e desregulação imune, nos quais os limiares de sinalização do CD8 impactam o fenótipo e a função.
CD8-β O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus CD8B em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de CD8B. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função CD8B. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com CD8B interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.