CD79B Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m): sc-421055

Descripción general

Cd79b codifica CD79B (Igβ), una subunidad de señalización esencial del complejo del receptor de antígeno de las células B (BCR) que se asocia con CD79A para acoplar el reconocimiento de inmunoglobulinas de superficie con la señalización intracelular. A través de su motivo ITAM, CD79B coordina el reclutamiento de quinasas y proteínas adaptadoras para propagar vías dependientes del BCR que regulan el desarrollo, la activación, el procesamiento de antígenos y la supervivencia de las células B. La función de CD79B está estrechamente vinculada a cascadas posteriores, incluidas la señalización mediada por SYK/BTK y la activación de las vías NF-κB y MAPK, moldeando las respuestas inmunitarias y la tolerancia. La señalización del BCR desregulada y la expresión o función alteradas de CD79B se estudian con frecuencia en el contexto de los mecanismos de malignidad de células B y de la disrregulación inmunitaria, lo que convierte a Cd79b en un locus útil para investigar redes de señalización en células B.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO CD79B (m) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Cd79b en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Cd79b junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Cd79b tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína CD79B.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Cd79b para la investigación de la señalización de CD79B, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de Cd79b críticos para la función de CD79B
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Cd79b para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido CD79B CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido CD79B CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Cd79b. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR CD79B (m) y el plásmido HDR CD79B (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Cd79b para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Cd79b definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.