Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
CD48 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m): sc-419559
- Especies Diana: mouse
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- CD48 El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico CD48, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: CD48 Anticuerpo (5-4.8): sc-8400
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
CD48 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-419559 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
El gen murino **Cd48** codifica CD48, un receptor de la superfamilia de las inmunoglobulinas anclado a glicosilfosfatidilinositol (GPI), ampliamente expresado en células hematopoyéticas, que participa en la adhesión y la coestimulación de células inmunes. CD48 se une a CD2 y al receptor 2B4 (CD244) de la familia SLAM, modulando la formación de la sinapsis inmunológica y ajustando los umbrales de activación en células T, células NK y células presentadoras de antígeno. A través de estas interacciones, CD48 influye en la producción de citocinas, la función efectora citotóxica y el tráfico de leucocitos dentro de microambientes inflamatorios. La señalización y la expresión desreguladas de CD48 se han asociado con una homeostasis inmunitaria alterada en modelos de autoinmunidad, inflamación crónica, infección y biología de neoplasias hematológicas.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO CD48 (m) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Cd48 en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Cd48 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Cd48 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína CD48.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Cd48 para la investigación de la señalización de CD48, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de Cd48 críticos para la función de CD48
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Cd48 para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido CD48 CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido CD48 CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Cd48. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR CD48 (m) y el plásmido HDR CD48 (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Cd48 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Cd48 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.