CD40 Plasmídeo duplo de Nickase (m): sc-423444-NIC
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- CD40O plasmídeo de dupla Nickase (m) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase CD40 (m) e o Plasmídeo Double Nickase CD40 (m2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para Cd40. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:CD40 Anticorpo (HM40-3): sc-20010
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
CD40 Plasmídeo duplo de Nickase (m) | sc-423444-NIC | 20 µg | $410.00 |
O Cd40 de camundongo codifica o CD40, um membro da superfamília de receptores de TNF expresso em células apresentadoras de antígeno e em outros subconjuntos do sistema imune, onde medeia a comunicação coestimuladora com o CD40L para coordenar respostas imunes adaptativas. A sinalização de CD40 recruta proteínas adaptadoras TRAF para ativar as vias canônica e não canônica de NF-κB, MAPK e PI3K, impulsionando a produção de citocinas, programas de apresentação de antígenos e decisões de sobrevivência celular. Em células B, o CD40 contribui para a formação de centros germinativos, a recombinação de troca de classe e a maturação de afinidade; já em células mieloides, modula a ativação inflamatória e a comunicação com células T. A atividade desregulada do eixo CD40 está implicada em fenótipos autoimunes e inflamatórios crônicos, em respostas imunes relacionadas a transplantes e na remodelação do microambiente imune tumoral, o que o torna um alvo frequente em estudos de imunologia mecanística.
CD40 O Plasmídeo de Nickase Dupla (m) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus Cd40 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de Cd40. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função Cd40. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com Cd40 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.