Partículas Lentivirales de Activación (m) CD37: sc-419547-LAC

Cd37 codifica CD37, una glicoproteína de superficie de la familia de las tetraspaninas, altamente expresada en células B y otros subgrupos de leucocitos, donde organiza microdominios de membrana que coordinan la señalización de receptores. CD37 modula el receptor de células B y las vías coestimuladoras, influyendo en la actividad de quinasas de la familia Src, la señalización PI3K/AKT, los flujos de calcio y los programas transcripcionales posteriores que determinan la activación, la proliferación y la supervivencia. A través de su papel en el tráfico y el agrupamiento de receptores inmunitarios y moléculas de adhesión, CD37 contribuye a la presentación de antígenos, la migración celular y la formación de la sinapsis inmunológica. La alteración de la expresión o la función de CD37 se ha asociado con disrregulación inmunitaria y con la biología de enfermedades hematológicas vinculadas a las células B, lo que lo convierte en una diana relevante para estudios mecanísticos de las redes de señalización de linfocitos.

Las partículas de activación lentiviral CD37 (m) responden a esta necesidad al empaquetar el sistema completo de activación transcripcional del mediador de activación sinérgica (SAM) en partículas lentivirales de alto título listas para la transducción, lo que permite una regulación al alza eficiente de Cd37 en una gama más amplia de tipos de células humanas.

Las partículas de activación lentiviral CD37 (m) suministran todos los componentes funcionales del sistema mediador de activación sinérgica (SAM) a través de la transducción lentiviral. El sistema comprende tres preparaciones de partículas cotransducidas en las células diana: una que codifica dCas9 catalíticamente inactivo (mutaciones D10A y N863A) fusionado al dominio de transactivación VP64 con un gen de resistencia a la blasticidina; otra que codifica la proteína de fusión MS2-p65-HSF1 con un gen de resistencia a la higromicina; y otra que codifica un ARN guía (sgRNA) específico del objetivo de 20 nt fusionado a dos aptámeros de ARN MS2 con un gen de resistencia a la puromicina. Tras la transducción lentiviral y la integración genómica de los casetes de expresión, los componentes del SAM se expresan de forma estable y se ensamblan en el locus diana dentro de la región promotora proximal, aguas arriba del sitio de inicio de la transcripción Cd37, donde VP64, p65 y HSF1 actúan de forma cooperativa para reclutar la maquinaria transcripcional endógena e impulsar la regulación al alza sostenida de la expresión endógena de CD37. El uso de dCas9 inactivo frente a nucleasas evita la introducción de roturas de ADN de doble cadena y preserva el locus genómico nativo Cd37 y la arquitectura reguladora.

El formato lentiviral ofrece varias ventajas prácticas: la integración genómica estable permite la activación hereditaria a lo largo de las divisiones celulares; las preparaciones de partículas de alto título eliminan la necesidad de producir el virus internamente; y la compatibilidad con tipos de células primarias, no divisibles y resistentes a la transfección amplía la accesibilidad experimental. La transducción exitosa puede confirmarse y enriquecerse mediante selección con triple antibiótico utilizando puromicina, higromicina y blasticidina.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.