Plasmide Double Nickase (h) CD36: sc-400233-NIC

CD36 code un récepteur scavenger multifonctionnel de classe B, exprimé sur les macrophages, les adipocytes, les cellules endothéliales et les plaquettes, qui se lie aux acides gras à longue chaîne, aux phospholipides oxydés et à la thrombospondine‑1. En régulant l'absorption des lipides et leur trafic intracellulaire, CD36 s'articule avec la signalisation métabolique, les programmes inflammatoires et la reconnaissance innée des motifs (pattern recognition), notamment via des voies associées à la formation de cellules spumeuses et aux réponses au stress oxydatif. La détection des ligands dépendante de CD36 façonne la polarisation des macrophages et l'homéostasie vasculaire, ce qui en fait un nœud central dans l'étude de la biologie de l'athérosclérose, de la résistance à l'insuline et du remodelage tissulaire lié à l'inflammation. Des modifications de l'expression ou de l'activité de CD36 ont également été associées à l'activation plaquettaire et à la dysfonction microvasculaire, soulignant sa pertinence à large spectre dans la recherche cardiométabolique et immunométabolique.

CD36 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus CD36 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de CD36. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de CD36. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.

Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de CD36.

Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.