CD300E Lentiviral Activation Particles (h): sc-415572-LAC

CD300E (auch bekannt als IREM-2) kodiert einen Rezeptor der Immunglobulin-Superfamilie, der hauptsächlich auf Zellen der myeloiden Linie exprimiert wird und dort die Aktivierung der angeborenen Immunantwort sowie entzündliche Signalwege moduliert. Die Aktivierung von CD300E kann an adaptorabhängige Signalwege gekoppelt sein, die zelluläre Aktivierungsprogramme fördern, darunter Zytokinproduktion, phagozytäre Antworten und die Reifung antigenpräsentierender Zellen, und dabei mit NF-κB- und MAPK-assoziierten Prozessen zusammenwirken. Eine veränderte Regulation der Signalübertragung myeloider Rezeptoren ist für Zustände der Immundysregulation und die Biologie entzündlicher Erkrankungen relevant; entsprechend werden CD300E-Expressionsmuster häufig in Studien zur Leukozytenaktivierung und zu immunologischen Gewebemikroumgebungen untersucht. Als membranständiger Immunrezeptor ist CD300E zudem nützlich, um zu analysieren, wie aktivierende Rezeptornetzwerke die funktionelle Polarisierung von Makrophagen und dendritischen Zellen prägen.

CD300E Lentivirale Aktivierungspartikel (h) erfüllen diesen Bedarf, indem sie das vollständige Transkriptionsaktivierungssystem des Synergistic Activation Mediator (SAM) in transduktionsbereite, hoch-titrige lentivirale Partikel verpacken und so eine effiziente CD300E-Hochregulation über ein breiteres Spektrum menschlicher Zelltypen ermöglichen.

CD300E Lentivirale Aktivierungspartikel (h) liefern alle funktionellen Komponenten des Synergistic Activation Mediator (SAM)-Systems über lentivirale Transduktion. Das System umfasst drei Partikelpräparate, die gemeinsam in Zielzellen transduziert werden: eines, das für katalytisch inaktives dCas9 (Mutationen D10A und N863A) kodiert, das mit der VP64-Transaktivierungsdomäne und einem Blasticidin-Resistenzgen fusioniert ist; eines, das für das MS2-p65-HSF1-Fusionsprotein mit einem Hygromycin-Resistenzgen kodiert; und eines, das für eine zielspezifische 20-nt-sgRNA kodiert, die an zwei MS2-RNA-Aptamere mit einem Puromycin-Resistenzgen fusioniert ist. Nach der lentiviralen Transduktion und der genomischen Integration der Expressionskassetten werden die SAM-Komponenten stabil exprimiert und lagern sich am Zielort innerhalb der proximalen Promotorregion stromaufwärts der CD300E-Transkriptionsstartstelle an, wo VP64, p65 und HSF1 kooperativ wirken, um endogene Transkriptionsmaschinerie zu rekrutieren und eine anhaltende Hochregulation der endogenen CD300E-Expression zu bewirken. Die Verwendung von nuklease-inaktivem dCas9 verhindert die Einführung von Doppelstrangbrüchen in der DNA und bewahrt den nativen CD300E-Genomlokus sowie die regulatorische Architektur.

Das lentivirale Format bietet mehrere praktische Vorteile: Die stabile genomische Integration unterstützt eine vererbbare Aktivierung über Zellteilungen hinweg; Partikelpräparate mit hohem Titer machen eine eigene Virusproduktion überflüssig; und die Kompatibilität mit primären, sich nicht teilenden und transfektionsresistenten Zelltypen erweitert die experimentellen Möglichkeiten. Eine erfolgreiche Transduktion kann durch eine dreifache Antibiotika-Selektion mit Puromycin, Hygromycin und Blasticidin bestätigt und verstärkt werden.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.