CD22 Lentiviral Activation Particles (m): sc-419539-LAC

Das Mausgen *Cd22* kodiert CD22, ein auf B-Zellen beschränktes, sialinsäurebindendes, immunglobulinähnliches Lektin, das als inhibitorischer Korezeptor des B‑Zell-Rezeptors (BCR) fungiert. Durch die Rekrutierung von Phosphatasen wie SHP‑1 an ITIM-Motive dämpft CD22 die proximale BCR-Signalübertragung und moduliert nachgeschaltete Signalwege einschließlich PI3K/AKT, MAPK und Calciumfluss. Dadurch beeinflusst es Aktivierungsschwellen, Überleben und antigengetriebene Selektion. CD22 trägt zudem über Interaktionen mit α2,6‑sialylierten Glykanen zur Adhäsion und zum Trafficking von B‑Zellen bei und beeinflusst die Dynamik von Keimzentren sowie Toleranz-Checkpoints. Eine fehlregulierte CD22-Expression oder -Signalgebung ist in experimentellen Mausmodellen breit relevant für Studien zur B‑Zell‑Hyperreaktivität, zur mit Autoimmunität assoziierten Immunregulation und zu Mechanismen von Malignitäten der B‑Zell‑Linie.

CD22 Lentivirale Aktivierungspartikel (m) erfüllen diesen Bedarf, indem sie das vollständige Transkriptionsaktivierungssystem des Synergistic Activation Mediator (SAM) in transduktionsbereite, hoch-titrige lentivirale Partikel verpacken und so eine effiziente Cd22-Hochregulation über ein breiteres Spektrum menschlicher Zelltypen ermöglichen.

CD22 Lentivirale Aktivierungspartikel (m) liefern alle funktionellen Komponenten des Synergistic Activation Mediator (SAM)-Systems über lentivirale Transduktion. Das System umfasst drei Partikelpräparate, die gemeinsam in Zielzellen transduziert werden: eines, das für katalytisch inaktives dCas9 (Mutationen D10A und N863A) kodiert, das mit der VP64-Transaktivierungsdomäne und einem Blasticidin-Resistenzgen fusioniert ist; eines, das für das MS2-p65-HSF1-Fusionsprotein mit einem Hygromycin-Resistenzgen kodiert; und eines, das für eine zielspezifische 20-nt-sgRNA kodiert, die an zwei MS2-RNA-Aptamere mit einem Puromycin-Resistenzgen fusioniert ist. Nach der lentiviralen Transduktion und der genomischen Integration der Expressionskassetten werden die SAM-Komponenten stabil exprimiert und lagern sich am Zielort innerhalb der proximalen Promotorregion stromaufwärts der Cd22-Transkriptionsstartstelle an, wo VP64, p65 und HSF1 kooperativ wirken, um endogene Transkriptionsmaschinerie zu rekrutieren und eine anhaltende Hochregulation der endogenen CD22-Expression zu bewirken. Die Verwendung von nuklease-inaktivem dCas9 verhindert die Einführung von Doppelstrangbrüchen in der DNA und bewahrt den nativen Cd22-Genomlokus sowie die regulatorische Architektur.

Das lentivirale Format bietet mehrere praktische Vorteile: Die stabile genomische Integration unterstützt eine vererbbare Aktivierung über Zellteilungen hinweg; Partikelpräparate mit hohem Titer machen eine eigene Virusproduktion überflüssig; und die Kompatibilität mit primären, sich nicht teilenden und transfektionsresistenten Zelltypen erweitert die experimentellen Möglichkeiten. Eine erfolgreiche Transduktion kann durch eine dreifache Antibiotika-Selektion mit Puromycin, Hygromycin und Blasticidin bestätigt und verstärkt werden.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.