Partículas Lentivirales de Activación (m) CD206/Mannose Receptor/MMR: sc-421707-LAC

Mrc1 codifica CD206/Receptor de Manosa (MMR), un receptor depurador tipo lectina C enriquecido en macrófagos y células dendríticas, que se une a glicanos con manosa, fucosa y N-acetilglucosamina presentes en patógenos y en glucoproteínas endógenas. CD206 media endocitosis y fagocitosis dependientes de clatrina, favoreciendo la captación y el procesamiento de antígenos, el tráfico lisosomal y el reconocimiento impulsado por glicanos en la inmunidad innata. Se utiliza ampliamente como marcador de polarización alternativa de macrófagos (tipo M2) y participa en vías que modulan la remodelación tisular, la reparación de heridas y programas de citocinas inmunorreguladoras. La alteración de la expresión de CD206 se ha implicado en inflamación crónica, fibrosis, disfunción metabólica y la biología de macrófagos asociados a tumores, lo que hace que Mrc1 sea relevante para estudios de regulación del microambiente e interacciones huésped–patógeno en modelos murinos.

Las partículas de activación lentiviral CD206/Mannose Receptor/MMR (m) responden a esta necesidad al empaquetar el sistema completo de activación transcripcional del mediador de activación sinérgica (SAM) en partículas lentivirales de alto título listas para la transducción, lo que permite una regulación al alza eficiente de Mrc1 en una gama más amplia de tipos de células humanas.

Las partículas de activación lentiviral CD206/Mannose Receptor/MMR (m) suministran todos los componentes funcionales del sistema mediador de activación sinérgica (SAM) a través de la transducción lentiviral. El sistema comprende tres preparaciones de partículas cotransducidas en las células diana: una que codifica dCas9 catalíticamente inactivo (mutaciones D10A y N863A) fusionado al dominio de transactivación VP64 con un gen de resistencia a la blasticidina; otra que codifica la proteína de fusión MS2-p65-HSF1 con un gen de resistencia a la higromicina; y otra que codifica un ARN guía (sgRNA) específico del objetivo de 20 nt fusionado a dos aptámeros de ARN MS2 con un gen de resistencia a la puromicina. Tras la transducción lentiviral y la integración genómica de los casetes de expresión, los componentes del SAM se expresan de forma estable y se ensamblan en el locus diana dentro de la región promotora proximal, aguas arriba del sitio de inicio de la transcripción Mrc1, donde VP64, p65 y HSF1 actúan de forma cooperativa para reclutar la maquinaria transcripcional endógena e impulsar la regulación al alza sostenida de la expresión endógena de CD206/Mannose Receptor/MMR. El uso de dCas9 inactivo frente a nucleasas evita la introducción de roturas de ADN de doble cadena y preserva el locus genómico nativo Mrc1 y la arquitectura reguladora.

El formato lentiviral ofrece varias ventajas prácticas: la integración genómica estable permite la activación hereditaria a lo largo de las divisiones celulares; las preparaciones de partículas de alto título eliminan la necesidad de producir el virus internamente; y la compatibilidad con tipos de células primarias, no divisibles y resistentes a la transfección amplía la accesibilidad experimental. La transducción exitosa puede confirmarse y enriquecerse mediante selección con triple antibiótico utilizando puromicina, higromicina y blasticidina.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.