Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Plásmido Doble Nickase (h) CD20: sc-416765-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)CD20 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa CD20 (h) y el plásmido de doble nickasa CD20 (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a MS4A1. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: CD20 Anticuerpo (D-10): sc-393894
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) CD20 | sc-416765-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) CD20 | sc-416765-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
MS4A1 codifica CD20, una proteína de membrana tetraspánica expresada selectivamente en los linfocitos B que contribuye a la activación, proliferación y diferenciación de las células B. CD20 participa en la regulación del flujo de Ca2+ y en la organización de microdominios de membrana que coordinan la señalización del receptor de células B y vías posteriores como PI3K/AKT, NF-κB y MAPK. La expresión de CD20 define etapas clave del desarrollo de las células B y se utiliza ampliamente como marcador de linaje en inmunología. La señalización alterada de las células B y la expresión desregulada de MS4A1 son relevantes para estudios sobre inflamación autoinmunitaria y la biología de enfermedades hematológicas impulsadas por células B.
CD20 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus MS4A1 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de MS4A1. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de MS4A1. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con MS4A1 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.