Plasmide Double Nickase (h) CD1C: sc-403813-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) CD1C correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide CD1C Double Nickase (h) et le plasmide CD1C Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant CD1C. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: CD1C Antibody (B-6): sc-390980
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) CD1C | sc-403813-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) CD1C | sc-403813-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
CD1C code pour CD1c, une molécule de présentation de l’antigène de type CMH de classe I qui se lie à des antigènes lipidiques et glycolipidiques et les présente aux lymphocytes T, orientant ainsi la reconnaissance immunitaire adaptative. CD1c est fortement exprimée par certains sous-types de cellules dendritiques et participe au trafic endosomal ainsi qu’aux processus de chargement des antigènes, faisant le lien entre la détection innée et l’amorçage des lymphocytes T. Par la présentation d’antigènes restreinte au CD1, CD1c influence la polarisation immune et les programmes de cytokines impliqués dans la défense de l’hôte et la régulation de l’inflammation. Des modifications de l’abondance ou de la fonction des cellules dendritiques exprimant CD1c ont été associées à une dérégulation immunitaire dans l’auto-immunité, les infections et l’inflammation liée aux tumeurs, ce qui fait de CD1C un point d’entrée utile pour les études de mécanismes en immunologie.
CD1C Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus CD1C dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de CD1C. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de CD1C. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de CD1C.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.