Datos CRISPR no: la imagen ilustra la calidad de los anticuerpos para visualizar los resultados de los experimentos CRISPR.
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CD19 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m): sc-419534
- Especies Diana: mouse
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- CD19 El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico CD19, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: CD19 Anticuerpo (F-3): sc-373897
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
CD19 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-419534 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
El gen **Cd19** de ratón codifica **CD19**, un correceptor de superficie restringido a las células B que amplifica la señalización del complejo del receptor de células B (BCR) mediante el reclutamiento de quinasas y proteínas adaptadoras, coordinando la actividad de las vías **PI3K/AKT** y **MAPK** aguas abajo. Al ajustar los umbrales de activación, el flujo de calcio, la proliferación y la supervivencia, CD19 contribuye a las respuestas del centro germinal y a una inmunidad humoral eficaz. Las alteraciones en la señalización dependiente de CD19 y en los estados de diferenciación de las células B se utilizan ampliamente como lecturas mecanísticas en inmunología y en modelos de enfermedades hematológicas, incluidos estudios sobre la activación aberrante de células B y la identidad de linaje.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO CD19 (m) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Cd19 en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Cd19 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Cd19 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína CD19.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Cd19 para la investigación de la señalización de CD19, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de Cd19 críticos para la función de CD19
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Cd19 para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido CD19 CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido CD19 CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Cd19. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR CD19 (m) y el plásmido HDR CD19 (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Cd19 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Cd19 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.