Plásmido Doble Nickase (h) CD151: sc-401969-NIC

CD151 es una glucoproteína de superficie celular de la familia de las tetraspaninas que organiza microdominios enriquecidos en tetraspaninas y modula la actividad y el tráfico de receptores asociados, en particular integrinas como α3β1, α6β1 y α6β4. A través de estas interacciones, CD151 influye en la adhesión, el extendido (spreading) y la migración celular, así como en la transducción de señales vinculada a la remodelación del citoesqueleto, la dinámica de las adhesiones focales y la interacción con la matriz extracelular. La organización de la membrana dependiente de CD151 afecta procesos como la integridad epitelial, el comportamiento angiogénico y la motilidad de células inmunitarias, y la alteración de la expresión o función de CD151 se ha asociado con la progresión tumoral, el potencial metastásico y fenotipos de remodelación tisular. Como regulador tipo andamiaje, CD151 constituye un nodo manejable para diseccionar redes de señalización asociadas a integrinas y la compartimentalización de la membrana en células humanas.

CD151 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus CD151 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de CD151. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de CD151. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.

Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con CD151 alterado.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.