Plásmido Doble Nickase (h) CBX7: sc-402903-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)CBX7 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa CBX7 (h) y el plásmido de doble nickasa CBX7 (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a CBX7. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: CBX7 Anticuerpo (G-3): sc-376274
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) CBX7 | sc-402903-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) CBX7 | sc-402903-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
CBX7 (chromobox 7) codifica una proteína del grupo Polycomb con dominio chromodomain que reconoce H3K27me3 y ayuda a ensamblar complejos PRC1 canónicos para promover la compactación de la cromatina y una represión transcripcional estable. Mediante la regulación de programas génicos del desarrollo, puntos de control del ciclo celular y la senescencia celular, CBX7 contribuye al mantenimiento de la memoria epigenética y de estados transcripcionales específicos de linaje. La actividad desregulada de CBX7 se ha asociado con una diferenciación alterada y un control proliferativo anómalo en múltiples contextos de enfermedad, incluidos los cánceres, donde los cambios en el silenciamiento mediado por Polycomb pueden remodelar redes oncogénicas y de supresores tumorales. Como lector de cromatina dentro de las vías Polycomb, CBX7 se estudia con frecuencia para dilucidar cómo se interpretan las marcas de histonas para controlar las salidas transcripcionales a escala genómica.
CBX7 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus CBX7 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de CBX7. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de CBX7. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con CBX7 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.