Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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caveolin-3 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-400569
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- caveolin-3 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico caveolin-3, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:caveolin-3 Anticorpo (A-3): sc-5310
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
caveolin-3 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-400569 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
O CAV3 codifica a caveolina-3, um componente estrutural das caveolas enriquecido no músculo, que organiza microdomínios de membrana e serve de plataforma para complexos de sinalização no sarcolema. A caveolina-3 contribui para a mecanoproteção e o tráfego de membrana e modula vias que envolvem sinalização por GPCRs, sinalização do receptor de insulina, regulação de canais iônicos e sinalização por óxido nítrico, por meio da compartimentalização de receptores e quinases. No músculo estriado, ela sustenta a organização dos túbulos T, o acoplamento excitação–contração e a estabilidade do complexo de proteínas associado à distrofina. Alterações na função ou na expressão de CAV3 estão associadas a caveolinopatias que afetam músculo esquelético e cardíaco, incluindo fenótipos distróficos, cardiomiopatia e mecanismos relacionados a arritmias, tornando-o relevante para estudos de sinalização de membrana e integridade muscular.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO caveolin-3 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene CAV3 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do CAV3, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do CAV3 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína caveolin-3.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de CAV3 para a investigação da sinalização de caveolin-3, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) CAV3 críticos para a função caveolin-3
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos CAV3 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo caveolin-3 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo caveolin-3 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus CAV3. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo caveolin-3 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR caveolin-3 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia CAV3 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo CAV3 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.