Datos CRISPR no: la imagen ilustra la calidad de los anticuerpos para visualizar los resultados de los experimentos CRISPR.
Datos CRISPR no: la imagen ilustra la calidad de los anticuerpos para visualizar los resultados de los experimentos CRISPR.
CARM1 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m): sc-425576
- Especies Diana: mouse
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- CARM1 El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico CARM1, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: CARM1 Anticuerpo (D-6): sc-390656
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
CARM1 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-425576 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
Carm1 codifica la metiltransferasa de arginina asociada a coactivadores 1 (CARM1/PRMT4), una metiltransferasa de arginina de histonas y de proteínas no histónicas que regula la accesibilidad de la cromatina y los programas transcripcionales. CARM1 metila sustratos como la histona H3 (p. ej., H3R17/H3R26) y reguladores transcripcionales, coordinando la expresión génica dependiente de la ARN polimerasa II, el empalme (splicing) alternativo y la transcripción sensible a señales. En células de ratón, Carm1 influye en vías vinculadas a la señalización de receptores nucleares y factores de crecimiento, las decisiones de destino celular y el control epigenético de la diferenciación y la proliferación. La actividad desregulada de CARM1 se estudia ampliamente en contextos de regulación transcripcional aberrante, defectos del desarrollo y señalización oncogénica, lo que la convierte en una diana relevante para estudios mecanísticos de redes epigenéticas y transcripcionales.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO CARM1 (m) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Carm1 en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Carm1 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Carm1 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína CARM1.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Carm1 para la investigación de la señalización de CARM1, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de Carm1 críticos para la función de CARM1
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Carm1 para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido CARM1 CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido CARM1 CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Carm1. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR CARM1 (m) y el plásmido HDR CARM1 (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Carm1 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Carm1 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.