CARD 6 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-413684

Descripción general

CARD6 (miembro 6 de la familia de dominios de reclutamiento de caspasas) es una proteína adaptadora humana que contiene un dominio CARD, implicada en la señalización de los receptores de reconocimiento de patrones y en la modulación de las respuestas inflamatorias. A través de interacciones proteína–proteína mediadas por CARD, CARD6 se ha asociado con la regulación de la actividad de las vías NF-κB y MAPK aguas abajo de la detección microbiana y de señales de estrés, influyendo en la producción de citocinas y en la activación de la inmunidad innata. Se ha debatido la alteración de la señalización de CARD6 en el contexto de inflamación desregulada y fisiopatología asociada al sistema inmunitario, lo que la hace relevante para estudios mecanísticos de la defensa del huésped y de las redes de señalización inflamatoria.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO CARD 6 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen CARD6 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del CARD6 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de CARD6 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína CARD 6.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en CARD6 para la investigación de la señalización de CARD 6, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de CARD6 críticos para la función de CARD 6
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de CARD6 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido CARD 6 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido CARD 6 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus CARD6. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR CARD 6 (h) y el plásmido HDR CARD 6 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología CARD6 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana CARD6 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.