Datos CRISPR no: la imagen ilustra la calidad de los anticuerpos para visualizar los resultados de los experimentos CRISPR.
Datos CRISPR no: la imagen ilustra la calidad de los anticuerpos para visualizar los resultados de los experimentos CRISPR.
Caper Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-416921
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- Caper El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico Caper, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: Caper Anticuerpo (G-10): sc-376531
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Caper Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-416921 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
RBM39 codifica la proteína humana de unión a ARN Caper, un factor nuclear de empalme (splicing) que acopla la transcripción al procesamiento del pre-ARNm mediante interacciones con componentes del espliceosoma y correaguladores transcripcionales. Caper contribuye a las decisiones de empalme alternativo y a programas de metabolismo del ARN que modelan la progresión del ciclo celular, la diferenciación y la expresión génica sensible al estrés. La actividad desregulada de RBM39 y los patrones de empalme aberrantes se han vinculado a salidas de señalización oncogénica y a una composición alterada del proteoma en múltiples contextos tumorales. Como resultado, RBM39 se estudia con frecuencia para conectar la función del espliceosoma con la reprogramación de vías y con mecanismos impulsados por ARN de fenotipos relevantes para la enfermedad.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO Caper (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen RBM39 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del RBM39 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de RBM39 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína Caper.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en RBM39 para la investigación de la señalización de Caper, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de RBM39 críticos para la función de Caper
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de RBM39 para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido Caper CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido Caper CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus RBM39. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR Caper (h) y el plásmido HDR Caper (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología RBM39 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana RBM39 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.