Plásmido Doble Nickase (h) CAMTA1: sc-405328-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)CAMTA1 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa CAMTA1 (h) y el plásmido de doble nickasa CAMTA1 (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a CAMTA1. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) CAMTA1 | sc-405328-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) CAMTA1 | sc-405328-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
CAMTA1 codifica el activador de la transcripción 1 con unión a calmodulina, un factor de transcripción nuclear que acopla la señalización de Ca2+/calmodulina a programas de expresión génica. A través de su dominio de unión al ADN CG-1 y de sus repeticiones de anquirina reguladoras, CAMTA1 integra señales dependientes de calcio con el control de la cromatina y de la transcripción, influyendo en la diferenciación neuronal, la transcripción vinculada a la actividad sináptica y vías más amplias de respuesta al estrés. La alteración de la regulación de CAMTA1 se ha asociado con fenotipos del neurodesarrollo y neurodegenerativos, y la disrupción genómica de CAMTA1 se observa de forma recurrente en varios cánceres, lo que respalda su relevancia para estudios de desregulación transcripcional. Estas características hacen de CAMTA1 un objetivo útil para desentrañar redes transcripcionales impulsadas por el calcio y transiciones de estado celular en sistemas modelo humanos.
CAMTA1 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus CAMTA1 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de CAMTA1. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de CAMTA1. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con CAMTA1 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.