Plásmido Doble Nickase (h) Calpain 10: sc-405032-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)Calpain 10 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa Calpain 10 (h) y el plásmido de doble nickasa Calpain 10 (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a CAPN10. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) Calpain 10 | sc-405032-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) Calpain 10 | sc-405032-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
CAPN10 codifica la calpaína 10, una proteasa cisteína atípica regulada por calcio, implicada en una proteólisis limitada que modula el recambio proteico, la dinámica del citoesqueleto y la transducción de señales. La calpaína 10 se ha relacionado con la homeostasis mitocondrial, la señalización de la insulina y las respuestas al estrés metabólico, influyendo en procesos como la utilización de la glucosa y la adaptación celular al estado nutricional. La variación genética y la alteración de la actividad de CAPN10 se han asociado con la susceptibilidad a fenotipos metabólicos, incluida la resistencia a la insulina y rasgos relacionados con la diabetes tipo 2, lo que respalda su relevancia en la biología de las enfermedades metabólicas. En modelos celulares, la perturbación de CAPN10 se utiliza para investigar la regulación dependiente de proteasas de la función de los orgánulos, la señalización de estrés y la reorganización de vías.
Calpain 10 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus CAPN10 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de CAPN10. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de CAPN10. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con CAPN10 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.