Datos CRISPR no: la imagen ilustra la calidad de los anticuerpos para visualizar los resultados de los experimentos CRISPR.
Datos CRISPR no: la imagen ilustra la calidad de los anticuerpos para visualizar los resultados de los experimentos CRISPR.
C1QBP Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m): sc-419387
- Especies Diana: mouse
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- C1QBP El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico C1QBP, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: C1QBP Anticuerpo (74.5.2): sc-23885
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
C1QBP Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-419387 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
C1qbp codifica C1QBP (también conocida como gC1qR/p32), una proteína multifuncional enriquecida en las mitocondrias que sostiene la fosforilación oxidativa, la función del ribosoma mitocondrial y el metabolismo energético celular. También participa en el procesamiento de ARN y regula la apoptosis y la señalización inmunitaria innata mediante interacciones con vías relacionadas con el complemento y con el reconocimiento de patrones. En sistemas murinos, la alteración de la actividad de C1QBP se ha vinculado con respuestas al estrés mitocondrial, cambios en la señalización inflamatoria y susceptibilidad a fenotipos relevantes para el metabolismo y la neurodegeneración. Estas funciones convierten a C1QBP en un nodo útil para analizar la comunicación entre mitocondrias e inmunidad y la regulación bioenergética en modelos de enfermedad.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO C1QBP (m) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen C1qbp en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del C1qbp junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de C1qbp tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína C1QBP.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en C1qbp para la investigación de la señalización de C1QBP, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de C1qbp críticos para la función de C1QBP
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de C1qbp para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido C1QBP CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido C1QBP CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus C1qbp. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR C1QBP (m) y el plásmido HDR C1QBP (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología C1qbp para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana C1qbp definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.