C/EBP β Plásmido CRISPR/Cas9 KO (r): sc-437357

Descripción general

La proteína beta de unión a CCAAT/potenciador (C/EBP β, Cebpb) es un factor de transcripción de tipo cremallera de leucina básica (bZIP) que coordina programas génicos que controlan la diferenciación mieloide, la adipogénesis y las respuestas de fase aguda de los hepatocitos en células de rata. Integra señales de vías inflamatorias y metabólicas, incluido el crosstalk entre JAK/STAT impulsado por citocinas y NF-κB, para regular redes transcripcionales que moldean la activación inmunitaria, las respuestas al estrés y la proliferación celular. La actividad de C/EBP β influye en la polarización de macrófagos y en la expresión de genes lipogénicos, lo que la vincula a modelos experimentales de inflamación crónica, disfunción metabólica y remodelación tisular. Por ello, la alteración de la transcripción dependiente de Cebpb se utiliza ampliamente para investigar los mecanismos subyacentes a la fibrosis, la resistencia a la insulina y la dinámica de la señalización inflamatoria.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO C/EBP β (r) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen en líneas celulares rat. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína C/EBP β.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en para la investigación de la señalización de C/EBP β, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de críticos para la función de C/EBP β
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido C/EBP β CRISPR/Cas9 KO (r) y el plásmido C/EBP β CRISPR/Cas9 KO (r2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus . Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR C/EBP β (r) y el plásmido HDR C/EBP β (r2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.