BTBD2 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m): sc-431551

Descripción general

Btbd2 codifica BTBD2, una proteína que contiene un dominio BTB/POZ y que se cree que actúa como adaptador en redes de interacción proteína–proteína que influyen en la proteostasis dependiente de ubiquitina y en el recambio regulado de factores celulares. Los procesos asociados a BTBD2 se han vinculado al control de la amplitud de la señalización y a vías de respuesta al estrés mediante la modulación de la estabilidad proteica, con efectos posteriores sobre la progresión del ciclo celular y los programas de diferenciación. En sistemas murinos, la alteración de Btbd2 ofrece un medio para investigar cómo los andamiajes con dominio BTB contribuyen a la homeostasis tisular y a fenotipos del desarrollo. La proteostasis desregulada y el control anómalo de la señalización son ampliamente relevantes para la biología de las enfermedades, incluidos contextos con defectos proliferativos y vulnerabilidad del neurodesarrollo.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO BTBD2 (m) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Btbd2 en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Btbd2 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Btbd2 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína BTBD2.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Btbd2 para la investigación de la señalización de BTBD2, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de Btbd2 críticos para la función de BTBD2
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Btbd2 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido BTBD2 CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido BTBD2 CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Btbd2. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR BTBD2 (m) y el plásmido HDR BTBD2 (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Btbd2 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Btbd2 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.