BRD3 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (m): sc-426528

概要

Brd3は、ヒストン上のアセチル化リジンに結合してクロマチンの修飾マークを読み取り、転写プログラムを協調的に制御する、ブロモドメイン含有タンパク質BETファミリーの一員であるBRD3をコードします。核内においてBRD3は、アセチル化クロマチンおよび転写コレギュレーターとの相互作用を介して、RNAポリメラーゼII依存的な遺伝子制御、エンハンサー活性、ならびに細胞周期に連動した転写制御に関与します。これらの機能によりBRD3は、分化・増殖・ストレス応答性遺伝子発現に影響を与えるエピジェネティックなシグナル伝達経路の一部として位置づけられます。BRD3に関連する転写ネットワークを含むBETタンパク質活性の破綻は、がん原性の遺伝子発現状態や炎症性シグナル伝達の文脈で関与が示されており、機序に基づく疾患モデリングにおける重要性を裏づけています。

BRD3 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）は、mouse細胞株におけるBrd3遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、Brd3内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、Brd3のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、BRD3タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、BRD3シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、Brd3欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• BRD3の機能に不可欠なBrd3エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、Brd3ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• BRD3 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）およびBRD3 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m2）によってコードされるgRNAは、Brd3遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  BRD3 HDRプラスミド（m）および BRD3 HDRプラスミド（m2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはBrd3ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のBrd3標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。