Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
BRD3 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-426528
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- BRD3 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico BRD3, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:BRD3 Anticorpo (2088C3a): sc-81202
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
BRD3 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-426528 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
Brd3 codifica a BRD3, um membro da família BET de proteínas contendo bromodomínios que se ligam a lisinas acetiladas em histonas para interpretar marcas de cromatina e coordenar programas transcricionais. No núcleo, a BRD3 contribui para a regulação gênica dependente da RNA polimerase II, para a atividade de enhancers e para o controle transcricional associado ao ciclo celular por meio de interações com cromatina acetilada e co-reguladores transcricionais. Essas funções posicionam a BRD3 em vias de sinalização epigenética que influenciam a diferenciação, a proliferação e a expressão gênica responsiva ao estresse. A atividade desregulada de proteínas BET, incluindo redes transcricionais associadas à BRD3, tem sido implicada em estados de expressão gênica oncogênicos e em contextos de sinalização inflamatória, reforçando sua relevância para a modelagem mecanística de doenças.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO BRD3 (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Brd3 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Brd3, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Brd3 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína BRD3.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Brd3 para a investigação da sinalização de BRD3, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Brd3 críticos para a função BRD3
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Brd3 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo BRD3 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo BRD3 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Brd3. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo BRD3 Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR BRD3 (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Brd3 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Brd3 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.