Plasmide Double Nickase (m) BPTF: sc-431488-NIC
- Espèces cibles: mouse
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (m) BPTF correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide BPTF Double Nickase (m) et le plasmide BPTF Double Nickase (m2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant Bptf. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (m) BPTF | sc-431488-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (m2) BPTF | sc-431488-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Bptf code pour le bromodomain PHD finger transcription factor (BPTF), une sous-unité centrale du complexe de remodelage de la chromatine NURF, qui reconnaît les marques histoniques et régule le positionnement des nucléosomes afin de contrôler l’expression génique. Dans les cellules de souris, BPTF contribue à des programmes transcriptionnels régissant la prolifération, la spécification de lignée et l’organisation du développement en coordonnant l’accessibilité de la chromatine au niveau des promoteurs et des enhancers. Grâce à son bromodomaine et à son doigt PHD, BPTF intègre les signaux épigénétiques aux réseaux de facteurs de transcription, influençant des processus tels que la transcription dépendante de l’ADN matrice et l’organisation de la chromatine. Une activité dérégulée de BPTF est impliquée dans des états de chromatine altérés et des sorties transcriptionnelles aberrantes, pertinents pour la biologie du cancer et d’autres maladies associées à une mauvaise régulation épigénétique.
BPTF Le plasmide double nickase (m) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus Bptf dans les lignées cellulaires mouse. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de Bptf. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de Bptf. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de Bptf.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.