BMP-8A CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h): sc-406589

Übersicht

BMP8A kodiert Bone Morphogenetic Protein 8A (BMP-8A), einen sezernierten Liganden der TGF-β-Superfamilie, der über BMP-Rezeptoren signalisiert und SMAD1/5/9-abhängige Transkriptionsprogramme aktiviert. BMP-8A trägt zur Regulation der Entwicklungs­musterung, der Gewebedifferenzierung und des Gewebeumbaus bei und kann zelluläre Prozesse wie Proliferation, Linienfestlegung (Lineage Commitment) und die Dynamik der extrazellulären Matrix beeinflussen. Als Teil des breiteren BMP-Signalnetzwerks überschneidet sich BMP8A mit Signalwegen, die Morphogenese und Organogenese steuern, und kann das Crosstalk mit MAPK- sowie anderen kontextabhängigen Signalkaskaden modulieren. Eine dysregulierte BMP-Signalwegaktivität, einschließlich veränderter Ligandenverfügbarkeit, ist mit abweichenden Entwicklungsphänotypen assoziiert und wurde in krankheitsrelevanten Zusammenhängen untersucht, etwa bei Fibrose, in der Skelettbiologie und bei Signalprozessen im Tumormikromilieu.

Das BMP-8A CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) ist ein Pool von Plasmiden, die für die gezielte Disruption des BMP8A-Gens in human-Zelllinien entwickelt wurden. Jedes Plasmid koexprimiert eine einzigartige Single-Guide-RNA (sgRNA), die auf eine bestimmte Stelle innerhalb des BMP8A-Gens abzielt, zusammen mit der Streptococcus pyogenes Cas9-Nuklease. Die Plasmide kodieren zudem für GFP, was die fluoreszente Identifizierung und Anreicherung erfolgreich transfizierter Zellen mittels Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie ermöglicht.

Das Multi-Guide-Design erhöht die Wahrscheinlichkeit, dass Insertionen oder Deletionen (Indels) entstehen, die den offenen Leserahmen von BMP8A nach der Cas9-vermittelten Bildung von Doppelstrangbrüchen unterbrechen. Durch das CRISPR/Cas9-System verursachte DNA-Brüche werden über endogene NHEJ-Wege (Non-Homologous End Joining) repariert, was häufig zu Frameshift-Mutationen führt, die die BMP-8A-Proteinexpression aufheben.

Dieses CRISPR-Knockout-System ermöglicht die effiziente Erzeugung von BMP8A-defizienten Zellmodellen zur Untersuchung der BMP-8A-Signalübertragung, für funktionelle Genomstudien, in der Krebsbiologieforschung sowie zur Bewertung therapeutischer Reaktionen in menschlichen Zelllinien.

Hauptmerkmale

• sgRNAs, die auf BMP8A-Exone abzielen, die für die BMP-8A-Funktion entscheidend sind
  Ko-Expression von SpCas9 und sgRNA aus einem einzigen Plasmid zur vereinfachten Verabreichung
  GFP-Reporter zur Identifizierung transfizierter Zellen
  Pool von Plasmiden, die auf mehrere BMP8A-Genomstellen abzielen, um die Knockout-Effizienz zu verbessern
  Kompatibel mit der Verabreichung durch Transfektion

Designvarianten

CRISPRs +/- HDRs

• gRNAs, die vom BMP-8A CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) und vom BMP-8A CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h2) kodiert werden, zielen auf unterschiedliche Stellen innerhalb des BMP8A-Lokus ab. Es kann ein oder beide Targeting-Designs verfügbar sein. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
  HDR-Donorkonstrukte, kodiert durch das BMP-8A HDR-Plasmid (h) und BMP-8A HDR-Plasmid (h2) kodiert, enthalten eine Puromycin-Resistenzkassette und einen RFP-Reporter, flankiert von BMP8A-Homologiearmen, um die homologe Reparatur an definierten BMP8A-Zielstellen entsprechend den CRISPR/Cas9-KO-Designs zu unterstützen. Die Verfügbarkeit von HDR-Donoren kann variieren. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.