Plasmide Double Nickase (h) BMP-1: sc-402432-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) BMP-1 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide BMP-1 Double Nickase (h) et le plasmide BMP-1 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant BMP1. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) BMP-1 | sc-402432-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) BMP-1 | sc-402432-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
BMP1 code la protéine morphogénétique osseuse 1 (BMP‑1), une métalloprotéase sécrétée de la famille des astacines qui agit comme procollagène C‑protéinase et comme régulateur de la maturation de la matrice extracellulaire. BMP‑1 clive de multiples précurseurs et modulateurs matriciels, notamment des procollagènes fibrillaires et des protéines qui influencent la signalisation TGF‑β/BMP, coordonnant ainsi la fibrillogenèse du collagène, le remodelage tissulaire et la morphogenèse. Par ces activités, BMP‑1 influe sur des voies liées au dépôt de matrice, à la fibrose et à la réparation des plaies, et des altérations de la fonction de BMP1 ont été associées à des phénotypes héréditaires de fragilité des tissus conjonctifs et des os. BMP1 est donc largement étudié dans des modèles cellulaires et tissulaires afin d’analyser la signalisation dépendante de la MEC, le remodelage stromal et les changements de comportement cellulaire induits par la matrice.
BMP-1 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus BMP1 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de BMP1. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de BMP1. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de BMP1.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.