Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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BLM hydrolase Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-404411
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- BLM hydrolase El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico BLM hydrolase, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: BLM hydrolase Anticuerpo (F-9): sc-166777
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
BLM hydrolase Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-404411 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
El gen humano **BLMH** codifica la **hidrolasa de bleomicina**, una aminopeptidasa citosólica de cisteína implicada en el procesamiento proteolítico de péptidos intracelulares y en el mantenimiento del control de calidad de las proteínas. BLMH participa en el reciclaje de aminoácidos y se ha relacionado con respuestas al estrés celular a través de sus efectos sobre el recambio de péptidos y las redes de proteostasis. La actividad alterada de BLMH se ha estudiado en el contexto del metabolismo de fármacos y de la susceptibilidad a la citotoxicidad inducida por bleomicina, y también se ha explorado por posibles conexiones con fenotipos neurodegenerativos e inflamatorios en los que se alteran las vías de eliminación de péptidos. Como enzima de expresión amplia, BLMH constituye un nodo útil para investigar cómo la homeostasis dependiente de peptidasas se interseca con el estrés oxidativo y la señalización de respuesta al daño.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO BLM hydrolase (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen BLMH en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del BLMH junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de BLMH tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína BLM hydrolase.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en BLMH para la investigación de la señalización de BLM hydrolase, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de BLMH críticos para la función de BLM hydrolase
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de BLMH para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido BLM hydrolase CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido BLM hydrolase CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus BLMH. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR BLM hydrolase (h) y el plásmido HDR BLM hydrolase (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología BLMH para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana BLMH definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.