Plásmido Doble Nickase (h) beta Arrestin 1: sc-400642-NIC

ARRB1 codifica beta‑arrestina 1, un adaptador multifuncional que se une a los GPCR activados para mediar la desensibilización, la internalización y el tráfico de receptores. Más allá de la regulación canónica de los GPCR, la beta‑arrestina 1 actúa como andamiaje de módulos de señalización que incluyen MAPK/ERK, quinasas de la familia SRC y componentes de la maquinaria endocítica, modulando la amplitud y la duración de la señal. También influye en programas transcripcionales mediante interacciones que conectan receptores próximos a la membrana con respuestas nucleares, con efectos posteriores sobre la proliferación, la migración y la señalización inflamatoria. La desregulación de la señalización dependiente de ARRB1 se ha implicado en contextos como la biología del cáncer, las respuestas al estrés cardiometabólico y procesos mediados por el sistema inmunitario, lo que la convierte en un nodo útil para el análisis de vías.

beta Arrestin 1 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus ARRB1 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de ARRB1. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de ARRB1. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.

Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con ARRB1 alterado.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.