Plasmide CRISPR/Cas9 KO beta 1 Adrenergic Receptor/ADRB1/β₁-AR (m): sc-419026

Présentation

Adrb1 code le récepteur β1-adrénergique murin (ADRB1/β1-AR), un récepteur couplé aux protéines G (RCPG) qui se couple principalement à Gs afin de stimuler l’adénylate cyclase, d’augmenter l’AMPc et d’activer une signalisation dépendante de la PKA. Dans le cœur et d’autres tissus excitables, le β1-AR régule la chronotropie, l’inotropie et l’adaptation métabolique via la phosphorylation de canaux ioniques et de protéines impliquées dans la gestion du Ca2+, avec en plus des interactions entre voies de signalisation via la désensibilisation médiée par les GRK/β-arrestines et l’internalisation du récepteur. Une signalisation β-adrénergique dérégulée ainsi qu’une expression ou une fonction altérée d’ADRB1 sont impliquées dans des modèles de réponses au stress cardiovasculaire, de remodelage associé à l’insuffisance cardiaque et d’arythmogénèse, et influencent également la lipolyse des adipocytes et le contrôle neuro-humoral. En tant que nœud central de la signalisation des catécholamines, ADRB1 est largement utilisé pour étudier la dynamique de signalisation des RCPG, le trafic des récepteurs et les programmes transcriptionnels en aval.

Le plasmide CRISPR/Cas9 KO beta 1 Adrenergic Receptor/ADRB1/β1-AR (m) est un ensemble de plasmides conçus pour la disruption ciblée du gène Adrb1 dans les lignées cellulaires mouse. Chaque plasmide co-exprime un ARN guide unique (sgRNA) ciblant un site distinct au sein du Adrb1, ainsi que la nucléase Cas9 de Streptococcus pyogenes. Les plasmides codent également pour la GFP, ce qui permet l'identification par fluorescence et l'enrichissement des cellules transfectées avec succès par microscopie à fluorescence ou cytométrie en flux.

La conception multi-guide augmente la probabilité de générer des insertions ou des délétions (indels) qui perturbent le cadre de lecture ouvert Adrb1 à la suite de la formation de cassures double brin médiées par Cas9. Les cassures d'ADN introduites par le système CRISPR/Cas9 sont réparées par des voies endogènes de jonction non homologue (NHEJ), ce qui entraîne fréquemment des mutations par décalage du cadre de lecture qui suppriment l'expression de la protéine beta 1 Adrenergic Receptor/ADRB1/β1-AR.

Ce système de knock-out CRISPR permet la génération efficace de modèles cellulaires déficients en Adrb1 pour l'étude de la signalisation de beta 1 Adrenergic Receptor/ADRB1/β1-AR, les études de génomique fonctionnelle, la recherche en biologie du cancer et l'évaluation des réponses thérapeutiques dans des lignées cellulaires humaines.

Caractéristiques principales

• sgRNA ciblant le ou les exons de Adrb1 essentiels à la fonction de beta 1 Adrenergic Receptor/ADRB1/β1-AR
  Co-expression de SpCas9 et de sgRNA à partir d'un seul plasmide pour une administration simplifiée
  Rapporteur GFP pour l'identification des cellules transfectées
  Pool de plasmides ciblant plusieurs sites génomiques de Adrb1 pour améliorer l'efficacité du knock-out
  Compatible avec l'administration par transfection

Variantes de conception

CRISPR +/- HDR

• Les gRNA codés par le beta 1 Adrenergic Receptor/ADRB1/β1-AR plasmide CRISPR/Cas9 KO (m) et le beta 1 Adrenergic Receptor/ADRB1/β1-AR plasmide CRISPR/Cas9 KO (m2) ciblent des sites distincts au sein du locus Adrb1. Une ou les deux conceptions de ciblage peuvent être disponibles. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
  Les constructions donneuses HDR codées par le beta 1 Adrenergic Receptor/ADRB1/β1-AR plasmide HDR (m) et le beta 1 Adrenergic Receptor/ADRB1/β1-AR (m2) contiennent une cassette de résistance à la puromycine et un rapporteur RFP flanqué de bras d'homologie Adrb1 pour permettre la réparation dirigée par homologie au niveau de sites cibles Adrb1 définis correspondant aux conceptions CRISPR/Cas9 KO. La disponibilité des donneurs HDR peut varier. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.

Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.