Bcr CRISPR/Cas9 KO Plasmid (m): sc-431007

Übersicht

Das Mausgen **Bcr** (Breakpoint-Cluster-Region) kodiert ein multidomainiges Signalprotein mit Serin/Threonin-Kinaseaktivität sowie einer C-terminalen Rho-Familien-GTPase-aktivierenden Domäne (RhoGAP). Dadurch trägt es zur Regulation der Zytoskelettdynamik, der Zelladhäsion und der Zellmigration bei. BCR ist an phosphorylierungsabhängiger Signaltransduktion beteiligt und kann Signalwege kleiner GTPasen modulieren, die Proliferation und Stressantworten beeinflussen. Im hämatopoetischen Kontext ist BCR vor allem als Fusionspartner von **ABL1** in der durch **BCR–ABL** getriebenen leukämogenen Signalgebung bekannt, wodurch seine normalen Funktionen für das Verständnis der Umverdrahtung onkogener Signalwege relevant sind. In Mausmodellen ermöglicht die gezielte Beeinflussung von **Bcr** mechanistische Studien zum Zusammenspiel von Kinase- und GTPase-Signalgebung, zum Aktin-Remodeling und zur kontextabhängigen Wachstumskontrolle.

Das Bcr CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (m) ist ein Pool von Plasmiden, die für die gezielte Disruption des Bcr-Gens in mouse-Zelllinien entwickelt wurden. Jedes Plasmid koexprimiert eine einzigartige Single-Guide-RNA (sgRNA), die auf eine bestimmte Stelle innerhalb des Bcr-Gens abzielt, zusammen mit der Streptococcus pyogenes Cas9-Nuklease. Die Plasmide kodieren zudem für GFP, was die fluoreszente Identifizierung und Anreicherung erfolgreich transfizierter Zellen mittels Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie ermöglicht.

Das Multi-Guide-Design erhöht die Wahrscheinlichkeit, dass Insertionen oder Deletionen (Indels) entstehen, die den offenen Leserahmen von Bcr nach der Cas9-vermittelten Bildung von Doppelstrangbrüchen unterbrechen. Durch das CRISPR/Cas9-System verursachte DNA-Brüche werden über endogene NHEJ-Wege (Non-Homologous End Joining) repariert, was häufig zu Frameshift-Mutationen führt, die die Bcr-Proteinexpression aufheben.

Dieses CRISPR-Knockout-System ermöglicht die effiziente Erzeugung von Bcr-defizienten Zellmodellen zur Untersuchung der Bcr-Signalübertragung, für funktionelle Genomstudien, in der Krebsbiologieforschung sowie zur Bewertung therapeutischer Reaktionen in menschlichen Zelllinien.

Hauptmerkmale

• sgRNAs, die auf Bcr-Exone abzielen, die für die Bcr-Funktion entscheidend sind
  Ko-Expression von SpCas9 und sgRNA aus einem einzigen Plasmid zur vereinfachten Verabreichung
  GFP-Reporter zur Identifizierung transfizierter Zellen
  Pool von Plasmiden, die auf mehrere Bcr-Genomstellen abzielen, um die Knockout-Effizienz zu verbessern
  Kompatibel mit der Verabreichung durch Transfektion

Designvarianten

CRISPRs +/- HDRs

• gRNAs, die vom Bcr CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (m) und vom Bcr CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (m2) kodiert werden, zielen auf unterschiedliche Stellen innerhalb des Bcr-Lokus ab. Es kann ein oder beide Targeting-Designs verfügbar sein. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
  HDR-Donorkonstrukte, kodiert durch das Bcr HDR-Plasmid (m) und Bcr HDR-Plasmid (m2) kodiert, enthalten eine Puromycin-Resistenzkassette und einen RFP-Reporter, flankiert von Bcr-Homologiearmen, um die homologe Reparatur an definierten Bcr-Zielstellen entsprechend den CRISPR/Cas9-KO-Designs zu unterstützen. Die Verfügbarkeit von HDR-Donoren kann variieren. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.