BCoR Plasmide Double Nickase (m): sc-427958-NIC
- Specie Target: mouse
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- BCoR Plasmide Double Nickase (m) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il BCoR Double Nickase Plasmid (m) e il BCoR Double Nickase Plasmid (m2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira Bcor. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
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| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
BCoR Plasmide Double Nickase (m) | sc-427958-NIC | 20 µg | $410.00 |
Bcor codifica per BCoR, un corepressore trascrizionale che interagisce con BCL6 e modula i programmi di espressione genica coordinando la repressione epigenetica. Nelle cellule murine, BCoR opera all’interno di complessi associati alla cromatina che si interfacciano con la regolazione dei gruppi Polycomb e con le vie di modificazione degli istoni, controllando la specificazione di linea, la differenziazione e stati trascrizionali legati al ciclo cellulare. Attraverso questi meccanismi, BCoR influenza reti trascrizionali dello sviluppo e dell’immunità ed è stato studiato nel contesto della deregolazione della repressione trascrizionale. Un’attività alterata di BCOR è associata a difetti nella definizione dei pattern di sviluppo e nella regolazione genica ematopoietica, rendendo Bcor un locus utile per indagare il controllo epigenetico del destino cellulare.
BCoR Il plasmide Double Nickase (m) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus Bcor nelle linee cellulari mouse. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di Bcor. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di Bcor. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con Bcor interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.