Plásmido Doble Nickase (h) Bcl-6: sc-400265-NIC

El BCL6 humano codifica Bcl-6, un represor transcripcional con dedos de zinc BTB/POZ que coordina programas de expresión génica que controlan la formación, proliferación y diferenciación de las células B del centro germinal. Bcl-6 modula la cromatina y la salida transcripcional mediante el reclutamiento de complejos correpresores, limitando así las respuestas al daño del ADN, la apoptosis y la señalización inflamatoria para mantener puntos de control del desarrollo estrictamente regulados. A nivel funcional, interactúa con vías como NF-κB, las respuestas al estrés dependientes de p53 y la señalización JAK/STAT impulsada por citocinas, moldeando decisiones sobre el destino de las células inmunitarias. La actividad desregulada de BCL6 y las redes alteradas de represión transcripcional se asocian fuertemente con la biología de las neoplasias de células B y la desregulación inmunitaria, por lo que es un blanco frecuente en estudios mecanísticos de transformación linfoide y control transcripcional.

Bcl-6 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus BCL6 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de BCL6. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de BCL6. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.

Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con BCL6 alterado.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.