Datos CRISPR no: la imagen ilustra la calidad de los anticuerpos para visualizar los resultados de los experimentos CRISPR.
Datos CRISPR no: la imagen ilustra la calidad de los anticuerpos para visualizar los resultados de los experimentos CRISPR.
BABAM1 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-409906
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- BABAM1 El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico BABAM1, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: BABAM1 Anticuerpo (H-10): sc-398570
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
BABAM1 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-409906 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
BABAM1 (BABAM1) es un componente central del complejo BRCA1-A que reconoce la cromatina ubiquitinada en los sitios de roturas de doble cadena del ADN y ayuda a coordinar la respuesta al daño del ADN. Mediante interacciones con BRCA1 y factores asociados, BABAM1 contribuye a la estabilidad del genoma al modular la señalización del daño e influir en la elección de la vía durante la reparación, incluidos procesos vinculados a la regulación de la recombinación homóloga. Su actividad se relaciona con el control de los puntos de control del ciclo celular y con las respuestas al estrés replicativo, lo que la hace relevante para estudios sobre la coordinación de la reparación dependiente de la cromatina. La desregulación de la función del complejo BRCA1-A se ha asociado con una capacidad de reparación del ADN alterada y con fenotipos de inestabilidad genómica observados en múltiples contextos de cáncer.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO BABAM1 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen BABAM1 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del BABAM1 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de BABAM1 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína BABAM1.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en BABAM1 para la investigación de la señalización de BABAM1, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de BABAM1 críticos para la función de BABAM1
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de BABAM1 para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido BABAM1 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido BABAM1 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus BABAM1. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR BABAM1 (h) y el plásmido HDR BABAM1 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología BABAM1 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana BABAM1 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.