Plasmide CRISPR/Cas9 KO BAALC (h): sc-405852

Présentation

BAALC (brain and acute leukemia, cytoplasmic) code une protéine cytoplasmique enrichie dans les contextes hématopoïétiques et neurodéveloppementaux, et impliquée dans la régulation de l’état des cellules progénitrices, notamment en ce qui concerne la prolifération et la différenciation. Dans les lignées myéloïdes, l’expression de BAALC est fréquemment utilisée comme corrélat moléculaire de programmes transcriptionnels immatures et de sorties de signalisation altérées, en interaction avec des voies qui modèlent la progression du cycle cellulaire, la survie et l’engagement de lignée. Des niveaux dérégulés de BAALC ont été associés aux leucémies aiguës, où ce gène est étudié au sein de réseaux d’expression génique plus larges liés à la leucémogenèse et à l’hétérogénéité de la maladie. Ces caractéristiques font de BAALC un nœud utile pour disséquer les mécanismes de maintien des cellules souches/progénitrices et de signalisation hématopoïétique aberrante dans des modèles cellulaires humains.

Le plasmide CRISPR/Cas9 KO BAALC (h) est un ensemble de plasmides conçus pour la disruption ciblée du gène BAALC dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide co-exprime un ARN guide unique (sgRNA) ciblant un site distinct au sein du BAALC, ainsi que la nucléase Cas9 de Streptococcus pyogenes. Les plasmides codent également pour la GFP, ce qui permet l'identification par fluorescence et l'enrichissement des cellules transfectées avec succès par microscopie à fluorescence ou cytométrie en flux.

La conception multi-guide augmente la probabilité de générer des insertions ou des délétions (indels) qui perturbent le cadre de lecture ouvert BAALC à la suite de la formation de cassures double brin médiées par Cas9. Les cassures d'ADN introduites par le système CRISPR/Cas9 sont réparées par des voies endogènes de jonction non homologue (NHEJ), ce qui entraîne fréquemment des mutations par décalage du cadre de lecture qui suppriment l'expression de la protéine BAALC.

Ce système de knock-out CRISPR permet la génération efficace de modèles cellulaires déficients en BAALC pour l'étude de la signalisation de BAALC, les études de génomique fonctionnelle, la recherche en biologie du cancer et l'évaluation des réponses thérapeutiques dans des lignées cellulaires humaines.

Caractéristiques principales

• sgRNA ciblant le ou les exons de BAALC essentiels à la fonction de BAALC
  Co-expression de SpCas9 et de sgRNA à partir d'un seul plasmide pour une administration simplifiée
  Rapporteur GFP pour l'identification des cellules transfectées
  Pool de plasmides ciblant plusieurs sites génomiques de BAALC pour améliorer l'efficacité du knock-out
  Compatible avec l'administration par transfection

Variantes de conception

CRISPR +/- HDR

• Les gRNA codés par le BAALC plasmide CRISPR/Cas9 KO (h) et le BAALC plasmide CRISPR/Cas9 KO (h2) ciblent des sites distincts au sein du locus BAALC. Une ou les deux conceptions de ciblage peuvent être disponibles. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
  Les constructions donneuses HDR codées par le BAALC plasmide HDR (h) et le BAALC (h2) contiennent une cassette de résistance à la puromycine et un rapporteur RFP flanqué de bras d'homologie BAALC pour permettre la réparation dirigée par homologie au niveau de sites cibles BAALC définis correspondant aux conceptions CRISPR/Cas9 KO. La disponibilité des donneurs HDR peut varier. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.

Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.