Autotaxin Lentiviral Activation Particles (h): sc-401889-LAC

ENPP2 kodiert Autotaxin, eine sekretierte Lysophospholipase D, die Lysophosphatidylcholin in Lysophosphatidsäure (LPA) umwandelt – einen bioaktiven Lipidmediator, der über LPA-Rezeptoren signalisiert und dadurch Zellmigration, Überleben, Zytoskelett-Remodellierung sowie die Dynamik von Gefäß- und Immunzellen reguliert. Die Autotaxin–LPA-Signalgebung ist mit GPCR-vermittelten Signalwegen verknüpft, darunter Rho/ROCK, PI3K–AKT, MAPK/ERK und YAP/TAZ-abhängige Transkriptionsprogramme, und prägt so Interaktionen mit der extrazellulären Matrix und entzündliche Signale. Eine Fehlregulation der ENPP2-Expression und eine erhöhte Autotaxin-Aktivität wurden in verschiedenen Geweben mit Fibrose, chronischer Entzündung und einem Umbau des Tumormikromilieus in Verbindung gebracht. Daher wird ENPP2 häufig im Kontext der Lipidsignalgebung, des stromal–immunologischen Crosstalks, angiogeneseassoziierter Prozesse und von Mechanismen invasiven Zellverhaltens untersucht.

Autotaxin Lentivirale Aktivierungspartikel (h) erfüllen diesen Bedarf, indem sie das vollständige Transkriptionsaktivierungssystem des Synergistic Activation Mediator (SAM) in transduktionsbereite, hoch-titrige lentivirale Partikel verpacken und so eine effiziente ENPP2-Hochregulation über ein breiteres Spektrum menschlicher Zelltypen ermöglichen.

Autotaxin Lentivirale Aktivierungspartikel (h) liefern alle funktionellen Komponenten des Synergistic Activation Mediator (SAM)-Systems über lentivirale Transduktion. Das System umfasst drei Partikelpräparate, die gemeinsam in Zielzellen transduziert werden: eines, das für katalytisch inaktives dCas9 (Mutationen D10A und N863A) kodiert, das mit der VP64-Transaktivierungsdomäne und einem Blasticidin-Resistenzgen fusioniert ist; eines, das für das MS2-p65-HSF1-Fusionsprotein mit einem Hygromycin-Resistenzgen kodiert; und eines, das für eine zielspezifische 20-nt-sgRNA kodiert, die an zwei MS2-RNA-Aptamere mit einem Puromycin-Resistenzgen fusioniert ist. Nach der lentiviralen Transduktion und der genomischen Integration der Expressionskassetten werden die SAM-Komponenten stabil exprimiert und lagern sich am Zielort innerhalb der proximalen Promotorregion stromaufwärts der ENPP2-Transkriptionsstartstelle an, wo VP64, p65 und HSF1 kooperativ wirken, um endogene Transkriptionsmaschinerie zu rekrutieren und eine anhaltende Hochregulation der endogenen Autotaxin-Expression zu bewirken. Die Verwendung von nuklease-inaktivem dCas9 verhindert die Einführung von Doppelstrangbrüchen in der DNA und bewahrt den nativen ENPP2-Genomlokus sowie die regulatorische Architektur.

Das lentivirale Format bietet mehrere praktische Vorteile: Die stabile genomische Integration unterstützt eine vererbbare Aktivierung über Zellteilungen hinweg; Partikelpräparate mit hohem Titer machen eine eigene Virusproduktion überflüssig; und die Kompatibilität mit primären, sich nicht teilenden und transfektionsresistenten Zelltypen erweitert die experimentellen Möglichkeiten. Eine erfolgreiche Transduktion kann durch eine dreifache Antibiotika-Selektion mit Puromycin, Hygromycin und Blasticidin bestätigt und verstärkt werden.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.