Plasmide Double Nickase (h) ATXN7L3: sc-407817-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) ATXN7L3 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide ATXN7L3 Double Nickase (h) et le plasmide ATXN7L3 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant ATXN7L3. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) ATXN7L3 | sc-407817-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) ATXN7L3 | sc-407817-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
ATXN7L3 (ataxine 7‑like 3) code un composant nucléaire du complexe coactivateur transcriptionnel SAGA, au sein duquel il soutient le module de déubiquitination qui régule l’état d’ubiquitination de l’histone H2B. En coordonnant l’accessibilité de la chromatine et la production transcriptionnelle, ATXN7L3 contribue à la régulation des gènes dépendante de l’ARN polymérase II, à l’activité des enhancers et, plus largement, au contrôle épigénétique des programmes d’identité cellulaire. Sa fonction recoupe le remodelage de la chromatine, les réponses transcriptionnelles associées aux dommages à l’ADN et les réseaux d’expression génique liés à la différenciation. Le dérèglement des mécanismes épigénétiques liés à SAGA et de la dynamique d’ubiquitination de H2B est pertinent pour l’étude de la reprogrammation transcriptionnelle associée au cancer et en neurobiologie, ce qui fait d’ATXN7L3 une cible utile pour la recherche mécanistique sur la chromatine.
ATXN7L3 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus ATXN7L3 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de ATXN7L3. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de ATXN7L3. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de ATXN7L3.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.