Attractin Lentiviral Activation Particles (h): sc-406420-LAC

ATRN kodiert Attractin, ein Typ‑I‑Transmembran‑Glykoprotein, das an Interaktionen zwischen Immunzellen und an der extrazellulären Kommunikation beteiligt ist. Es unterstützt Zelladhäsions‑ und Ligandenbindungsprozesse, die die Aktivierung und das Trafficking von Leukozyten beeinflussen. Attractin wird mit der Regulation inflammatorischer Signalwege und der Organisation der immunologischen Synapse in Verbindung gebracht und wurde im Kontext neuroimmunologischer Prozesse sowie der melanokortinbezogenen Biologie untersucht. Eine veränderte ATRN‑Expression oder ‑Funktion wurde mit Immunfehlregulation und neurologischen Phänotypen assoziiert, was ATRN zu einem relevanten Ziel für die Untersuchung von Signalwegen macht, die Entzündung, Zell‑Zell‑Kontakt und Gewebehomöostase miteinander verknüpfen. In humanen Zellmodellen stellt ATRN einen gut untersuchbaren Knotenpunkt dar, um Oberflächenrezeptor‑Netzwerke und nachgeschaltete transkriptionelle Programme zu analysieren.

Attractin Lentivirale Aktivierungspartikel (h) erfüllen diesen Bedarf, indem sie das vollständige Transkriptionsaktivierungssystem des Synergistic Activation Mediator (SAM) in transduktionsbereite, hoch-titrige lentivirale Partikel verpacken und so eine effiziente ATRN-Hochregulation über ein breiteres Spektrum menschlicher Zelltypen ermöglichen.

Attractin Lentivirale Aktivierungspartikel (h) liefern alle funktionellen Komponenten des Synergistic Activation Mediator (SAM)-Systems über lentivirale Transduktion. Das System umfasst drei Partikelpräparate, die gemeinsam in Zielzellen transduziert werden: eines, das für katalytisch inaktives dCas9 (Mutationen D10A und N863A) kodiert, das mit der VP64-Transaktivierungsdomäne und einem Blasticidin-Resistenzgen fusioniert ist; eines, das für das MS2-p65-HSF1-Fusionsprotein mit einem Hygromycin-Resistenzgen kodiert; und eines, das für eine zielspezifische 20-nt-sgRNA kodiert, die an zwei MS2-RNA-Aptamere mit einem Puromycin-Resistenzgen fusioniert ist. Nach der lentiviralen Transduktion und der genomischen Integration der Expressionskassetten werden die SAM-Komponenten stabil exprimiert und lagern sich am Zielort innerhalb der proximalen Promotorregion stromaufwärts der ATRN-Transkriptionsstartstelle an, wo VP64, p65 und HSF1 kooperativ wirken, um endogene Transkriptionsmaschinerie zu rekrutieren und eine anhaltende Hochregulation der endogenen Attractin-Expression zu bewirken. Die Verwendung von nuklease-inaktivem dCas9 verhindert die Einführung von Doppelstrangbrüchen in der DNA und bewahrt den nativen ATRN-Genomlokus sowie die regulatorische Architektur.

Das lentivirale Format bietet mehrere praktische Vorteile: Die stabile genomische Integration unterstützt eine vererbbare Aktivierung über Zellteilungen hinweg; Partikelpräparate mit hohem Titer machen eine eigene Virusproduktion überflüssig; und die Kompatibilität mit primären, sich nicht teilenden und transfektionsresistenten Zelltypen erweitert die experimentellen Möglichkeiten. Eine erfolgreiche Transduktion kann durch eine dreifache Antibiotika-Selektion mit Puromycin, Hygromycin und Blasticidin bestätigt und verstärkt werden.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.