Plasmide Double Nickase (h) ATRX: sc-400454-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) ATRX correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide ATRX Double Nickase (h) et le plasmide ATRX Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant ATRX. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: ATRX Antibody (D-5): sc-55584
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) ATRX | sc-400454-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) ATRX | sc-400454-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
ATRX code une remodelase de la chromatine dépendante de l’ATP, de type SWI/SNF, qui s’associe à DAXX pour déposer le variant d’histone H3.3 au niveau de régions génomiques répétées, notamment les télomères et l’hétérochromatine péricentromérique. En régulant le positionnement des nucléosomes, le calendrier de réplication de l’ADN et les programmes transcriptionnels, ATRX contribue au maintien de la stabilité du génome et d’une architecture chromatinienne appropriée. L’altération de la fonction d’ATRX est associée à des états épigénétiques modifiés et à des voies de maintenance des télomères, et est fréquemment étudiée dans des contextes tels que les troubles du neurodéveloppement et les cancers présentant un allongement alternatif des télomères (ALT). En tant que facteur nucléaire de la chromatine, ATRX est couramment étudié pour ses rôles dans les réponses aux dommages de l’ADN, la tolérance au stress réplicatif et le contrôle de l’expression des éléments répétitifs.
ATRX Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus ATRX dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de ATRX. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de ATRX. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de ATRX.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.