Plásmido Doble Nickase (h) ATP5G3: sc-403317-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)ATP5G3 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa ATP5G3 (h) y el plásmido de doble nickasa ATP5G3 (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a ATP5G3. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) ATP5G3 | sc-403317-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) ATP5G3 | sc-403317-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
ATP5G3 codifica la subunidad c del sector Fo de la ATP sintasa mitocondrial, un componente central de la fosforilación oxidativa que acopla la translocación de protones a través de la membrana interna mitocondrial con la producción de ATP. Al sostener la rotación del anillo c impulsada por la fuerza protón‑motriz, ATP5G3 contribuye a la bioenergética mitocondrial, al mantenimiento del potencial de membrana y a la regulación de la homeostasis de las especies reactivas de oxígeno. La actividad desregulada de la ATP sintasa y la expresión alterada de sus subunidades se estudian con frecuencia en el contexto de la disfunción mitocondrial, la reprogramación metabólica y las respuestas al estrés bioenergético relevantes para la neurodegeneración, los fenotipos cardiometabólicos y el metabolismo de células cancerosas. Por ello, ATP5G3 es un objetivo útil para analizar el rendimiento de la cadena respiratoria mitocondrial y la señalización downstream vinculada a la detección del estado energético celular.
ATP5G3 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus ATP5G3 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de ATP5G3. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de ATP5G3. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con ATP5G3 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.