Plásmido Doble Nickase (h) ASCL1: sc-402039-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)ASCL1 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa ASCL1 (h) y el plásmido de doble nickasa ASCL1 (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a ASCL1. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: ASCL1 Anticuerpo (G-7): sc-390794
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) ASCL1 | sc-402039-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) ASCL1 | sc-402039-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
ASCL1 (factor de transcripción 1 bHLH de la familia achaete-scute) es un regulador proneural que impulsa el compromiso con el linaje neuronal y la diferenciación al unirse a motivos E-box y coordinar programas transcripcionales que controlan la salida del ciclo celular, el crecimiento de neuritas y las decisiones de destino neurogénico. En contextos de desarrollo y reprogramación celular, ASCL1 interactúa con la señalización de Notch y la remodelación de la cromatina para equilibrar el mantenimiento de progenitores frente a la diferenciación, y se utiliza comúnmente como marcador y efector de estados transcripcionales de tipo neuroendocrino. La expresión desregulada de ASCL1 se ha vinculado con una plasticidad de linaje aberrante y con programas alterados de diferenciación neuroendocrina, lo que lo hace relevante para estudiar los circuitos transcripcionales en el desarrollo neural y la biología tumoral. Estas propiedades respaldan investigaciones sobre la especificación del destino celular, las redes de factores de transcripción y el control epigenético de la expresión génica neuronal.
ASCL1 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus ASCL1 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de ASCL1. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de ASCL1. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con ASCL1 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.