Plasmide CRISPR/Cas9 KO ASCC1 (h): sc-417767

Présentation

ASCC1 (activating signal cointegrator 1 complex subunit 1) est un facteur nucléaire impliqué dans la régulation de la transcription et le maintien du génome, agissant au sein du complexe coactivateur ASC-1/ASCC, qui s’interface avec l’expression génique dépendante de l’ARN polymérase II. ASCC1 a été associé aux réponses cellulaires au stress génotoxique et à la coordination de processus liés à la réparation de l’ADN, contribuant à une progression correcte du cycle cellulaire et au maintien de la protéostasie en conditions de stress. Une altération de la fonction d’ASCC1 a été associée à des phénotypes de maladies neuromusculaires, ce qui concorde avec un rôle essentiel dans le maintien de l’homéostasie tissulaire et des programmes d’expression génique dans les cellules différenciées. Par conséquent, ASCC1 est étudié dans des voies reliant la transcription, la signalisation des dommages à l’ADN et des réseaux régulateurs sensibles au stress.

Le plasmide CRISPR/Cas9 KO ASCC1 (h) est un ensemble de plasmides conçus pour la disruption ciblée du gène ASCC1 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide co-exprime un ARN guide unique (sgRNA) ciblant un site distinct au sein du ASCC1, ainsi que la nucléase Cas9 de Streptococcus pyogenes. Les plasmides codent également pour la GFP, ce qui permet l'identification par fluorescence et l'enrichissement des cellules transfectées avec succès par microscopie à fluorescence ou cytométrie en flux.

La conception multi-guide augmente la probabilité de générer des insertions ou des délétions (indels) qui perturbent le cadre de lecture ouvert ASCC1 à la suite de la formation de cassures double brin médiées par Cas9. Les cassures d'ADN introduites par le système CRISPR/Cas9 sont réparées par des voies endogènes de jonction non homologue (NHEJ), ce qui entraîne fréquemment des mutations par décalage du cadre de lecture qui suppriment l'expression de la protéine ASCC1.

Ce système de knock-out CRISPR permet la génération efficace de modèles cellulaires déficients en ASCC1 pour l'étude de la signalisation de ASCC1, les études de génomique fonctionnelle, la recherche en biologie du cancer et l'évaluation des réponses thérapeutiques dans des lignées cellulaires humaines.

Caractéristiques principales

• sgRNA ciblant le ou les exons de ASCC1 essentiels à la fonction de ASCC1
  Co-expression de SpCas9 et de sgRNA à partir d'un seul plasmide pour une administration simplifiée
  Rapporteur GFP pour l'identification des cellules transfectées
  Pool de plasmides ciblant plusieurs sites génomiques de ASCC1 pour améliorer l'efficacité du knock-out
  Compatible avec l'administration par transfection

Variantes de conception

CRISPR +/- HDR

• Les gRNA codés par le ASCC1 plasmide CRISPR/Cas9 KO (h) et le ASCC1 plasmide CRISPR/Cas9 KO (h2) ciblent des sites distincts au sein du locus ASCC1. Une ou les deux conceptions de ciblage peuvent être disponibles. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
  Les constructions donneuses HDR codées par le ASCC1 plasmide HDR (h) et le ASCC1 (h2) contiennent une cassette de résistance à la puromycine et un rapporteur RFP flanqué de bras d'homologie ASCC1 pour permettre la réparation dirigée par homologie au niveau de sites cibles ASCC1 définis correspondant aux conceptions CRISPR/Cas9 KO. La disponibilité des donneurs HDR peut varier. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.

Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.