Plasmide Double Nickase (h) Arginase 2/ARG2: sc-400639-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) Arginase 2/ARG2 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide Arginase 2/ARG2 Double Nickase (h) et le plasmide Arginase 2/ARG2 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant ARG2. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: Arginase 2/ARG2 Antibody (A-10): sc-393496
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) Arginase 2/ARG2 | sc-400639-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) Arg2 | sc-400639-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
ARG2 humain code l’arginase 2, une enzyme mitochondriale manganèse‑dépendante qui hydrolyse la L‑arginine en L‑ornithine et en urée, reliant le catabolisme des acides aminés au cycle de l’urée ainsi qu’aux voies biosynthétiques des polyamines et de la proline. En entrant en compétition avec les NO‑synthases pour la L‑arginine, ARG2 peut moduler la disponibilité du monoxyde d’azote et les programmes de signalisation redox, inflammatoires et vasculaires en aval. L’activité d’ARG2 s’intègre au métabolisme mitochondrial et à la polarisation fonctionnelle des cellules immunitaires, influençant la prolifération cellulaire et les réponses au stress via des polyamines dérivées de l’ornithine. Une dérégulation du métabolisme de l’arginine et une expression altérée d’ARG2 ont été associées à des états cardiométaboliques et inflammatoires, et ont été étudiées dans des contextes tels que la compétition pour les nutriments au sein du microenvironnement tumoral et le dysfonctionnement endothélial.
Arginase 2/ARG2 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus ARG2 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de ARG2. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de ARG2. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de ARG2.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.