Pas de données CRISPR : l'image illustre la qualité de l'anticorps pour la visualisation des résultats de l'expérience CRISPR.
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Plasmide CRISPR/Cas9 KO apoH (m): sc-419168
- Espèces cibles: mouse
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- apoH Le plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) est un ensemble de plasmides, chacun codant pour la nucléase Cas9 et un ARN guide (gRNA) de 20 nt spécifique à la cible, conçu pour une efficacité de knockout maximale à l'aide de séquences issues de la bibliothèque GeCKO v2
- Les séquences d'ARN guide (gRNA) dirigent Cas9 pour induire des cassures double brin (DSB) spécifiques au site dans le locus génomique apoH, entraînant un knock-out génique par jonction non homologue (NHEJ)
- Les gènes de résistance à la puromycine et RFP sont flanqués de sites LoxP, permettant la suppression des marqueurs de sélection via la recombinase Cre (Cre Vector : sc-418923) après l'établissement de lignées cellulaires knock-out stables
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: apoH Antibody (C-2): sc-515677
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide CRISPR/Cas9 KO apoH (m) | sc-419168 | 20 µg | $397.00 |
Présentation
Apoh code l’apolipoprotéine H (apoH ; β2‑glycoprotéine I), une glycoprotéine circulante se liant aux phospholipides, qui s’associe aux membranes anioniques et aux particules lipoprotéiques. Chez la souris, apoH participe aux processus de transport et de clairance des lipides et s’interface avec des voies liées à la coagulation et au complément grâce à ses interactions avec des phospholipides chargés négativement, exposés lors de l’activation ou des dommages cellulaires. Des altérations de la biologie d’APOH/apoH sont associées à une hémostase dérégulée et à des processus vasculaires inflammatoires, et elles sont fréquemment étudiées dans le contexte de la reconnaissance des phospholipides médiée par des auto‑anticorps. Ces fonctions font d’Apoh une cible utile pour étudier le dialogue lipides–immunité, la biologie des protéines se liant aux membranes et les mécanismes reliant l’inflammation à des phénotypes associés à la thrombose dans des modèles expérimentaux.
Le plasmide CRISPR/Cas9 KO apoH (m) est un ensemble de plasmides conçus pour la disruption ciblée du gène Apoh dans les lignées cellulaires mouse. Chaque plasmide co-exprime un ARN guide unique (sgRNA) ciblant un site distinct au sein du Apoh, ainsi que la nucléase Cas9 de Streptococcus pyogenes. Les plasmides codent également pour la GFP, ce qui permet l'identification par fluorescence et l'enrichissement des cellules transfectées avec succès par microscopie à fluorescence ou cytométrie en flux.
La conception multi-guide augmente la probabilité de générer des insertions ou des délétions (indels) qui perturbent le cadre de lecture ouvert Apoh à la suite de la formation de cassures double brin médiées par Cas9. Les cassures d'ADN introduites par le système CRISPR/Cas9 sont réparées par des voies endogènes de jonction non homologue (NHEJ), ce qui entraîne fréquemment des mutations par décalage du cadre de lecture qui suppriment l'expression de la protéine apoH.
Ce système de knock-out CRISPR permet la génération efficace de modèles cellulaires déficients en Apoh pour l'étude de la signalisation de apoH, les études de génomique fonctionnelle, la recherche en biologie du cancer et l'évaluation des réponses thérapeutiques dans des lignées cellulaires humaines.
Caractéristiques principales
- sgRNA ciblant le ou les exons de Apoh essentiels à la fonction de apoH
Co-expression de SpCas9 et de sgRNA à partir d'un seul plasmide pour une administration simplifiée
Rapporteur GFP pour l'identification des cellules transfectées
Pool de plasmides ciblant plusieurs sites génomiques de Apoh pour améliorer l'efficacité du knock-out
Compatible avec l'administration par transfection
Variantes de conception
CRISPR +/- HDR
- Les gRNA codés par le apoH plasmide CRISPR/Cas9 KO (m) et le apoH plasmide CRISPR/Cas9 KO (m2) ciblent des sites distincts au sein du locus Apoh. Une ou les deux conceptions de ciblage peuvent être disponibles. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Les constructions donneuses HDR codées par le apoH plasmide HDR (m) et le apoH (m2) contiennent une cassette de résistance à la puromycine et un rapporteur RFP flanqué de bras d'homologie Apoh pour permettre la réparation dirigée par homologie au niveau de sites cibles Apoh définis correspondant aux conceptions CRISPR/Cas9 KO. La disponibilité des donneurs HDR peut varier. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.