Plásmido Doble Nickase (h) apoF: sc-407655-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)apoF consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa apoF (h) y el plásmido de doble nickasa apoF (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a APOF. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) apoF | sc-407655-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) apoF | sc-407655-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
APOF codifica la apolipoproteína F (apoF), una glucoproteína secretada asociada a partículas de HDL y LDL que modula la remodelación de las lipoproteínas y el transporte de colesterol. La apoF influye en los procesos de intercambio lipídico en el plasma, incluidas vías relacionadas con la actividad de la lecitina–colesterol aciltransferasa y con la depuración mediada por receptores de lipoproteínas, contribuyendo así a la homeostasis lipídica sistémica. Las variaciones en la expresión y función de APOF se han vinculado con cambios en los perfiles de lípidos circulantes y con rasgos de riesgo cardiometabólico, por lo que resulta relevante para estudiar mecanismos asociados a la dislipidemia. En modelos celulares y animales, APOF ofrece un punto de intervención manejable para explorar la biología de las HDL, el manejo hepático de lípidos y las interacciones gen–ambiente que afectan al metabolismo lipídico.
apoF El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus APOF en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de APOF. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de APOF. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con APOF alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.