apoC-II Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m): sc-419164

Descripción general

El gen Apoc2 de ratón codifica la apolipoproteína C-II (apoC-II), una apolipoproteína secretada que actúa como cofactor esencial de la lipoproteína lipasa, promoviendo la hidrólisis de triglicéridos en los quilomicrones y las VLDL y permitiendo la captación de los ácidos grasos liberados por los tejidos periféricos. A través de esta función, la apoC-II es fundamental para el aclaramiento de triglicéridos plasmáticos y el transporte de lípidos, conectando la absorción intestinal de lípidos y la producción hepática de lipoproteínas con el metabolismo energético. La alteración de la función de APOC2 se asocia con fenotipos de hipertrigliceridemia grave y dislipoproteinemia, lo que proporciona un punto de entrada mecanístico para estudiar la homeostasis lipídica y las respuestas posteriores al estrés metabólico. Por ello, los modelos centrados en Apoc2 son útiles para investigar vías que conectan la lipólisis, el flujo de ácidos grasos y la remodelación de lipoproteínas.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO apoC-II (m) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Apoc2 en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Apoc2 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Apoc2 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína apoC-II.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Apoc2 para la investigación de la señalización de apoC-II, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de Apoc2 críticos para la función de apoC-II
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Apoc2 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido apoC-II CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido apoC-II CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Apoc2. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR apoC-II (m) y el plásmido HDR apoC-II (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Apoc2 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Apoc2 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.