ANT2 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-400680-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- ANT2O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase ANT2 (h) e o Plasmídeo Double Nickase ANT2 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para SLC25A5. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:ANT2 Anticorpo (F-7): sc-518109
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
ANT2 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-400680-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
ANT2 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-400680-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
SLC25A5 codifica a translocase de nucleotídeos de adenina 2 (ANT2), um transportador mitocondrial de ADP/ATP localizado na membrana interna que troca ADP citosólico por ATP da matriz, acoplando a fosforilação oxidativa à demanda energética celular. A ANT2 contribui para o transporte de metabólitos mitocondriais, a regulação do potencial de membrana e a integração da sinalização bioenergética com respostas ao estresse, incluindo ligações com a transição de permeabilidade e vias relacionadas à apoptose. Sua expressão é frequentemente associada a estados proliferativos e metabolicamente reprogramados, tornando-a relevante para estudos de disfunção mitocondrial, alterações no metabolismo energético e mudanças associadas a doenças nos programas de sobrevivência celular. Investigar a ANT2 ajuda a definir como a troca de nucleotídeos influencia a homeostase mitocondrial, o equilíbrio redox e redes de sinalização de crescimento.
ANT2 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus SLC25A5 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de SLC25A5. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função SLC25A5. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com SLC25A5 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.